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제목
[LC/MS] HPLC 의 common buffer의 종류와 LC/MS 와 호환성 있는 buffer list -
작성자
이매스 -
첨부파일
HPLC 와 LC/MS 장비는 기본적인 이동상을 사용해야 안정되게 sample 을 detector 까지 이동할 수 있게 됩니다. 일반적으로 HPLC 에서 사용하는 이동상 중에는 LC/MS 에 그대로 호환이 되는 buffer 가 있는 반면 그렇지 않은 경우도 있으므로 분석을 위한 각각의 장비에서의 buffer (이동상) 제조 시에 아래 테이블을 참조하면 도움이 될 수 있는 자료를 올려드립니다.
참고로 formic acid 나 acetate 시약( pH 산성화 )과 ammonium acetate(formate)(ion pair reagent) 를 병행해서 H2O/Methanol, H2O/Acetonitrile 사용하면 LC-MS 를 이용한 분석에 이동상의 최적화에 도움이 됩니다.
양이온 (positive ion) 분석 조건에서는 이 두 가지 유형의 시약을 모두 사용해도 무방하며, 음이온(negative ion) 분석 조건에서는 pH 산성화 시약을 사용하면 검출 민감도 (sensitivity) 가 낮아지므로 이점을 유의하여 사용하도록 합니다.
또 가장 유의할 점은 volatile 한 이온들로 구성된 buffer 만이 LC-MS 의 용매의 첨가제로 사용이 가능하다는 점입니다. 특히, phosphate 이온은 대표적인 non-volatile 이온으로 알려져 있고 이들 이온이 장비 내로 장시간 유입되면 감도 저하의 전형적인 증상이 나타납니다.
|
Common HPLC buffer (compatible LC/MS buffer) | ||||
|
Buffer |
pH range |
LC-MS compatible | ||
|
phosphate(pK1) |
1.1 |
– |
3.1 |
X |
|
phosphate(pK2) |
6.2 |
– |
8.2 |
X |
|
phosphate(pK3) |
11.3 |
– |
13.3 |
X |
|
acetate (ammonium acetate) |
3.8 |
– |
5.8 |
YES |
|
citrate(pK1) |
2.1 |
– |
4.1 |
X |
|
citrate(pK2) |
3.7 |
– |
5.7 |
X |
|
citrate(pK3) |
4.4 |
– |
6.4 |
X |
|
trifluoroacetic acid (0.1% v/v) |
2 |
YES | ||
|
phosphoric acid (0.1% v/v) |
2 |
X | ||
|
formic acid (0.1% v/v) |
2.7 |
YES | ||
|
ammonium formate |
2.7 |
– |
4.7 |
YES |
|
ammonium bicarbonate |
6.6 |
– |
8.6 |
YES |
|
borate |
8.3 |
– |
10.3 |
YES |
|
|
|
|
|
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|
( ) : for LC/MS, X : not compatible |
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