시험·검사기관 교육
식약처 지정 시험·검사기관 종사자에게 필요한 분석기술 기초(실습)교육을 제공합니다.(일반 수강자 제한없이 등록가능)
1. 교육장소 : 회사 연구소 (구로디지털단지 이마트 맞은편 코오롱디지털빌란트 405호 eMass 교육센터)
2. 교육 목적 :
1) 샘플을 의뢰하는 경우 정확하게 어떤 원리와 분석기준으로 결정되는지 확인한다.
2) 데이터의 신뢰성을 확인하기 위해서 정확한 데이터 해석방법을 익힌다.
3) 의뢰한 결과가 나쁜경우 원인을 찾기위한 샘플준비과정 및 장비의 문제점이 있을 경우 증상을 배워본다.
4) MS 분석과 Edman 분석의 장단점을 이해하고 연구시간과 비용을 절약하는 방법을 배워본다.
3. 교육 대상 :
1) N 말단 서열 분석 과정의 이해가 필요한 연구실 종사자 분(연구원, 대학원생)
2) N 말단 서열 분석이 연구 프로젝트에서의 중요성 이해가 필요하신 분
3) 단백질 서열 분석 장비에 관심이 있는 회사에 근무하시는 분
4) 기존 LC MS를 이용한 단백질 서열 분석과정에서 제한적인 문제에 직면한 경험이 있으신 연구실 종사자 분
4. 적용분야 :
A. Determination the N-terminal amino acids of a protein
: 가장 일반적으로 단백질의 N 말단 서열을 결정할 수 있습니다.
: 가장 일반적으로 단백질의 N 말단 서열을 결정할 수 있습니다.
B. Determination the N-terminal amino acids of a peptide
: 펩타이드의 N말단 서열을 결정할 수 있습니다.
: 펩타이드의 N말단 서열을 결정할 수 있습니다.
C. Check of the correct translation of a recombinant protein
: 재조합 단백질의 경우 유전자의 아미노산으로의 번역이 정상적으로 되었는지 확인이 가능합니다.
: 재조합 단백질의 경우 유전자의 아미노산으로의 번역이 정상적으로 되었는지 확인이 가능합니다.
D. Check of the sequence and purity of a recombinant protein
: 재조합 단백질의 순도와 아미노산 서열의 중간 점검이 가능합니다.
: 재조합 단백질의 순도와 아미노산 서열의 중간 점검이 가능합니다.
E. Check of the sequence and purity of a synthetic peptide
: 합성 펩티드의 순도와 아미노산 서열의 중간 점검이 가능합니다.
: 합성 펩티드의 순도와 아미노산 서열의 중간 점검이 가능합니다.
F. Determination of complete protein sequence in combination with additional methods
: 부가적인 분석 방법들과의 조합 (peptide mapping, C-terminal sequencing)을 통해 완벽한 아미노산 서열 결정이 가능합니다.
: 부가적인 분석 방법들과의 조합 (peptide mapping, C-terminal sequencing)을 통해 완벽한 아미노산 서열 결정이 가능합니다.
G. Quality control N-terminal sequencing is most commonly used to identify unknown proteins, confirm protein identity and quality (often for quality control of recombinant proteins), and identify protein N-terminus and cleavage sites
: 가장 일반적으로 unknown protein 의 경우 단백질 식별을 위한 부분 아미노산 서열 결정을 통해 부분적인 단백질 식별과 재조합 단백질의 품질 관리에도 활용되어 집니다. 또한 N말단의 protease cleavage 부위를 확인할 때에도 유용하게 사용되어집니다.
: 가장 일반적으로 unknown protein 의 경우 단백질 식별을 위한 부분 아미노산 서열 결정을 통해 부분적인 단백질 식별과 재조합 단백질의 품질 관리에도 활용되어 집니다. 또한 N말단의 protease cleavage 부위를 확인할 때에도 유용하게 사용되어집니다.
H. Homology based protein identification.
: 상동성을 기본으로 단백질 식별에 Edman sequencing 결과를 이용할 수 있습니다.
5. 세부일정 :
1) 자동화 기기에서 Edman 서열분석 과정 리뷰
2) N-달단 분석을 위한 Sample Prep 과정 팁
* 성공적인 서열분석을 위한 Sample 양
*최적의 PVDF blotting sample 준비방법
*최적의 Liquid sample 준비방법
*Edman Sequencing 에 사용 가능한 buffer 와 권장 membrane
*N 말단 deblocking method tip review
*Cysteine 의 modification 과정과 tip
3) ABRF 의 Protein Squencing 기술비교 리뷰
4) Data validation 방법 소개
5) 결과가 나쁜경우 원인 판정 방법
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