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    [LC/MS] LC-MS 에서의 이온화에 영향을 미치는 solvent 조건과 간단한 해결 tip

  • 작성자

    이매스

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LC-MS 분석은 HPLC 와 달리 Mass spectrometer 가 검출기 역활을 하므로 mobile phase 조건에 따라 분석 초반 생성되는 이온의 효율성과 질적인 부분도 큰 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 mass 분석에 있어서 HPLC mobile phase 의 조건의 변화를 통한 이온화 효율의 증대에 고려할 수 있는 참고 정보가 있어  본 정보를 소개 합니다.
 
1) 이온의 검출 감도를 억제하는 인자
 
- Salts : Spectrum 상에서 정확하게 precursor ion 만이 생성되지 않고 다양한 cluster 이온들이 생성됨으로써 복잡한 spectrum 이 만들어 진다. (데이터 해석이 어려워 진다.)
 
증상 : M+  또는 [M+H]+ 이온 대신 [M+H+Na]+, [M+H+K]+, 가 생성되는 경우 unexpected 한 m/z 값을 나타내는 이온으로 인한 분석상의 오류와 함께 [M+H]+ 이온 생성 효율의 저하를 유발한다.
 
- Strong bases or quaternary amines : positive mode 분석 시 양이온들과 상호작용하여 이온 생성을 억제한다. (e.g. Trimethylamine)
 
- Acids - Sulfuric/Sulfonic acids and TFA : negative mode 분석 시 음이온들과 상호작용하여 이온 생성을 억제한다.
 
- Non-volatile buffers (e.g. phosphate) and non-volatile ion pairing agents (e.g. SDS) : 복합적인 이온억제 요인을 만들거나 non-specific ion 생성을 유도하여 data 해석이 어려운 데이터를 얻게 된다.
 
- Dimerization ([2M+H]+) : sample 의 농도가 높은 경우 발생하는데, 정량 분석시 non-linearity 를 유도하여 정량측정 데이터의 신뢰성을 낮추는 문제를 야기한다.
 
2) 이온억제 요인의 제거를 위해 LC mobile phase 에서의 고려 사항
 
- Typical Organic Solvents ; Methanol & Acetonitrile
 
- Changing from acetonitrile to methanol may increase signal intensity for a weak base
 
- Organic acids (e.g. formic, acetic) promote ionization of basic compounds (N- containing)
•       Acetic acid at 0.1 - 1.0 % v/v
•       Formic acid at 0.1% v/v
•       TFA at up to 0.1% for pos. mode. (signal supression sometimes with TFA). 
   Do not use in negative ion mode.
 
- Adduct Reduction-Neutral compounds containing nucleophilic lon pairs can be ionized by cationization with alkali metal (e.g. Na+, K+)or ammonium ions
 
•       해결 방안 : 2-20 mM Ammonium Acetate or Formate 를 mobile phase 에 첨가
 
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