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일반적으로 당단백질로부터 당사슬 분리/정제를 위한 전처리 시 사용되는 시약 제조법

다음은 HPLC 및 MS로 당사슬을 분석 시 당단백질로부터 당사슬을 분리/정제을 위한 전처리에 사용되는 시약의 제조법입니다.


1. GC(Graphitized Carbon) column purification solution : 제조 후 일주일 이내 사용

◆ 80% ACN, 0.1% TFA : ACN 40㎖에 정제수 10㎖을 섞은 후, TFA 50㎕를 넣어준다.

◆ 25% ACN, 0.075% TFA : ACN 12.5㎖에 정제수 37.5㎖을 섞은 후, TFA 37.5㎕를 넣어준다.


2. Cyano column purification solution : 제조 후 일주일 이내 사용

◆ 25% ACN : ACN 12.5㎖에 정제수 37.5㎖을 넣어 섞어 준다.

◆ 96% ACN : ACN 48㎖에 정제수 2㎖을 넣어 섞어 준다.

◆ 60% ACN : ACN 30㎖에 정제수 20㎖을 넣어 섞어 준다.


3. 2-AA/2-AB labeling solution : 제조 후 암 상태에서 보관, 1시간 이내 사용

① 두 개의 1.5㎖ tube에 6㎎의 2-AA/AB와 6㎎의 sodium cyanoborohydride(NaCNBH2)를 각각 넣는다.

① DMSO 350㎕에 acetic acid 150㎕를 섞은 후 100㎕를 취해 2-AA/2-AB가 들어있는 tube에 넣고 녹인다.

③ 2번 solution 100㎕를 취해 sodium cyanoborohydride가 들어있는 1.5㎖ tube에 넣어 녹여서 준비한다.

※ Sodium cyanoborohydride가 잘 녹지 않을 경우 녹을 때까지 65℃ oven에 넣어 두고 중간에 살짝 tapping하여 섞어준다.

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